圆二色光谱仪是一种分析化学中常用的仪器,主要用于测量物质在不同波长下对于左旋圆偏振光和右旋圆偏振光的吸收情况,从而得到有关于样品结构、构象等信息。广泛应用于化学、生物学、医药等领域。
圆二色光谱仪利用了圆二色现象,即分子或离子具有左旋性或右旋性时,在经过旋光片(一个将线偏振光转化为圆偏振光的装置)后就会对不同方向的圆偏振光产生不同的吸收,这种差异可以通过测量样品在左旋圆偏振光和右旋圆偏振光下的吸收差异来进行分析。
圆二色光谱仪通常采用两个光源,一个是普通的白光源,另一个是偏振光源(通常是汞灯)。经过旋光片后,两个光源都会变成圆偏振光。这两个光源的圆偏振光再经过单色器或者光栅分光镜,被分为不同波长的光,并通过样品,最后被检测器检测到。在测量过程中,圆二色光谱仪可以同时检测左旋圆偏振光和右旋圆偏振光的吸收情况,并计算它们之间的差异,从而得到有关于样品结构、构象等信息。
圆二色光谱仪主要由以下几个部分组成:
光源:通常使用两个光源,一个是白光源,另一个是汞灯。这两个光源需要通过旋光片转化为圆偏振光,在经过单色器或者光栅分光镜分离出不同波长的光线。
旋光片:用于将线偏振光转化为圆偏振光。通常采用四分之一波片或半波片。
样品池:用于放置样品的仪器部件。通常使用四面透明的石英玻璃制作而成,以避免对于样品的影响。
检测器:可以检测样品在不同波长下对于左旋圆偏振光和右旋圆偏振光的吸收情况,并计算它们之间的差异。
计算机:用于控制仪器的测量参数,收集和分析数据。通过计算机还可以进行数据处理、绘图等操作。
圆二色光谱仪的优势包括:
1.可用于蛋白质、核酸等生物大分子的结构研究和定量分析。
2.测量简便,操作方便,不需要标记样品。
3.可同时测量多个样品或反应体系的动态变化。
4.适用于生物体系中不同结构的蛋白质和核酸。
5.具有高选择性和灵敏度,在微小的结构改变时也能检测到。